乙型肝炎病毒核心抗体诊断试剂盒(化学发光法)
【生产厂家】Roche Diagnostics GmbH
【批准文号】
【剂 型】诊断试剂盒
【规 格】
【医保类型】
【国家基本药物】否
英文名：Elecsys Anti-HBc
汉语拼音：Yi xing gan yan bing du he xin kang ti zhen duan shi ji he hua xue fa guang fa
【使用目的】
用免疫学方法定性测定人血清或血浆中的乙型肝炎病毒核心抗体。
电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Elecsys和MODULAR ANALYTICS E170免疫测定分析仪。
【概述】
乙肝病毒由外壳（HBsAg）和内核（HBcAg）组成。核心抗原含有183-185个氨基酸1。
HBV感染期间，通常会产生Anti-HBc，并常常持续终生。Anti-HBc在HBV感染后短时间内即出现，通常在HBsAg出现后不久可在血清中检测到。在康复者和HBsAg携带者中，Anti-HBc可持续存在，因此，Anti-HBc是提示过去或现在感染HBV的指标2。
偶尔，也有Anti-HBc阴性的HBV感染者（多见于免疫抑制病人）3。由于Anti-HBc可长时间存在，因此，在特殊人群中开展Anti-HBc筛选试验对预防乙型肝炎的传播有重要参考价值4。
抗HBc试验与其它乙型肝炎试验一同检测有助于乙型肝炎的诊断和监测。在其它乙型肝炎标志（HBsAg阴性者）缺乏的情况下，抗HBc可能是提示现存HBV感染的唯一指标5。
【原理】
采用竞争法原理，整个过程27分钟完成。
· 第1步孵育：40μl标本用还原试剂预处理9。
· 第2步孵育：加入HBcAg，标本中的Anti-HBc与HBcAg结合形成复合物。
· 第3步孵育：加入生物素化的和钌标记的Anti-HBc以及链霉亲和素包被的微粒，HBc抗原上仍然游离的位点被占据。形成的免疫复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。
· 第4步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。
· 自动得出结果，Elecsys软件自动将标本产生的光电信号与从抗HBc定标液得出的Cutoff值相比较。
【试剂主要成份】
M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml：
链霉亲和素包被的微粒，0.72mg/ml，生物素结合能力：470ng生物素/mg微粒。含防腐剂。
R0：DTT（白盖），1瓶，5ml：
二硫苏糖醇，浓度110mmol/l；枸橼酸缓冲液50mmol/l。
R1：HBcAg（灰盖），1瓶，8ml：
HBcAg（E.coli，rDNA），＞25ng/ml，磷酸缓冲液100mmol/l，pH7.4，含防腐剂。
R2：生物素化的Anti-HBc抗体；Ru(bpy)32+标记的Anti-HBc（黑盖），1瓶，8ml：
生物素化的Anti-HBc单克隆抗体（鼠），＞800ng/ml；Ru(bpy)32+标记的Anti-HBc单克隆抗体（鼠），＞130ng/ml；磷酸缓冲液100mmol/l，pH7.4，含防腐剂。
Cal 1 阴性定标液1（白盖），2瓶，1.0ml/瓶，人血清,含防腐剂。
Cal 2 阳性定标液2（黑盖），2瓶，1.0ml/瓶，抗HBc（人）＞8PEI－U/ml在人血清中,含防腐剂。
【预防措施和警告】
仅用于体外诊断。
采用正确的预防措施，遵照实验室试剂使用规定。
所有废物的丢弃应遵循当地法规的要求。
定标液制备使用的献血者血清经FDA批准的方法检定HBSAg（仅定标液1）、HCV抗体、HIV1＋2抗体均为阴性。
含有Anti-HBV的阳性定标液(定标液2)的血清使用β-丙稀内酯和UV射线低温消毒。
但由于任何实验方法都不能绝对地排除潜在感染的危险，故该产品仍需视作病人标本一样仔细处理。一旦泄漏，应遵循权威机构的指令6-7。
超过保质期后，不能再使用。
【试剂使用】
试剂盒为即用型,提供的试剂瓶与分析系统是兼容的。
Elecsys：定标物Cal 1和Cal 2只有在定标过程中才被放在分析仪上(在20-25℃)。定标物用完后,应立即盖好瓶盖并储存在2-8℃。确保在打开盖子后没有定标物粘在盖子上。因为可能会蒸发，每瓶定标液定标次数不宜超过5次。
E170：除非在E170上定标需要全部容量，否则将部分准备使用的定标液装入空的带标签的有盖小瓶，并将提供的标签贴在分装的其余小瓶上（CALSET）。储存在2－8℃。每瓶分装物只用作一次定标。
所有必要的操作信息,分别通过试剂的二维条码读取。
【储存和稳定性】
存放在2－8℃.
为了确保使用前自动混匀期间提供足够量的磁性微粒,Anti-HBc试剂盒储存,切莫倒置。
未开封2－8℃，可稳定至标明的保质期。
M，R0,R1，R2试剂开封后，2－8℃,8周
在仪器E170/Elecsys上， 8周
Cal 1和Cal 2开封后： 2－8℃,8周
在Elecsys上（20－25℃）： 最多5小时
在E170上： 一次性使用
注意：定标液要垂直保存。确保定标液没有附着在瓶盖上。
【标本采集和准备】
标本只有按照下列方法收集、检测才能被接受。
血清标本采集用标准样本试管或含分离胶的试管。
血浆：肝素(Li-,Na-)、K3－EDTA或枸橼酸钠抗凝。
血浆：肝素钠、EDTA－K3或枸橼酸钠抗凝。
（标准:正确检测出阴性样本和阳性样本）
稳定性：标本在2－8℃可稳定5天，-20℃可稳定3个月。标本可冻融5次8。
关于使用含分离胶试管的血清的稳定性的资料,要注意试管制造商提供的资料。
注意!尤其对于Anti-HBc检测非常重要:冷冻样本,含沉淀的标本,重复检测的样本使用前需离心。
可以使用加热灭活标本。标本和质控品禁用叠氮钠作稳定剂。
确保病人样本、定标物、质控物在测试前温度达到20-25℃。
因为可能挥发的影响,放在分析仪上的样本、定标物、质控物应在2小时内测试完。
【检测步骤】
提供的材料：
货号：11820559，100人份的Elecsys抗HBc试剂盒包含：
· M链霉亲和素包被的微粒
· R0 DTT
· R1 HBc Ag
· R2 生物素化的Anti-HBc，三联吡啶钌标记的Anti-HBc
· Cal 1 阴性定标液1
· Cal 2 阳性定标液2
· 2×6 小瓶标签
需要的材料（未提供）：
· Elecsys 抗HBc质控品1和2（PreciControl 抗HBc），每个8×1.3ml，货号11876325
· Elecsys 通用稀释液，2×18ml，货号11732277或Elecsys 通用稀释液，2×40ml，货号03183971
· Elecsys 定标液小瓶，2×56带盖空瓶，货号11776576
· 常用实验室设备
· Elecsys 或MODULAR ANALYTICS E170
Elecsys分析仪附件：
· Elecsys 系统缓冲液（ProCell）,6×380ml，货号11662988
· Elecsys 测量池清洗液（CleanCell），6×380ml，货号11662970
· Elecsys 添加剂液（SysWash），1×500ml，货号11930346
· Elecsys 系统清洗液支架（Adapter for SysClean），货号11933159
· Elecsys 反应杯（Assay Cup），60×60，货号11706802
· Elecsys 吸样头（Assay Tip），30×120，货号11706799
E170分析仪附件
· Elecsys 系统缓冲液（ProCell M）,1×2L,货号12135019
· Elecsys 测量池清洗液（CleanCell M）,1×2L,货号12135027
· Elecsys 系统缓冲液/测量池清洗液预热杯（PC/CC-Cup）,50个,货号03023141
· Elecsys 检测清洗液（PreClean M），5×600ml,货号03004899
· Elecsys 清洗液（ProbeWash M），12×70ml，用于最终清洗和试剂转换清洗，货号03005712
· Elecsys 反应杯/吸样头盒(AssayCups/AssayTips Combimagazine M),48×84，货号12102137
· Elecsys 废物盒(wasteliner)，货号03023150
· Elecsys 系统清洗液支架(SysClean Adapter M)，货号03027651
各种分析仪均适用的材料
· Elecsys 系统清洗液（SysClean），5×100ml，货号11298500
【方法】
按仪器操作说明进行操作。检查试剂与消耗品是否充足。
使用前需混匀微粒。仪器通过扫描试剂盒条形码自动输入测试所需的特异性参数，不需手工输入。如果特殊情况下仪器无法阅读条形码，可以手工输入15位数字。
E170/Elecsys：
将冷藏试剂预温到20℃后放置于仪器的试剂盘上，避免产生泡沫。系统自动控制试剂温度和开/关试剂瓶盖。
将定标液1和定标液2放在分析仪的标本测试区。只在标定时打开瓶盖。条形码自动提供定标所需的数据资料。定标完成后，将定标液1和定标液2放回2－8℃保存或丢弃(E170)。
【定标】
Elecsys Anti-HBc 用Paul Ehrlich Institute,langen(德国)的HBc参考定标品82(Anti-HBc IgG)作为标准。
定标频率：
每批试剂盒必须用新鲜试剂和抗HAV Cal 1,Cal 2定标一次（如：试剂包在仪器上登记后不超过24小时）。另外，以下情况需要再次定标：
· 同一批号试剂一个月后（28天）
· 7天（放置仪器上的同一试剂盒）
· 根据要求进行标定：如质控结果超出范围时
· 根据规定进行多次标定。
定标确认:
不需要。分析仪的软件会自动检查定标曲线的有效性及偏离。
定标液电化学发光信号范围（电化学发光信号计数）：
阴性定标液（Cal 1） 27,000-200,000(Elecsys )或100,000－600,000(E170)
阳性定标液（Cal 2） 100-3000(Elecsys 和E170)
【质控】
Elecsys Anti-HAV质控品。
质控品1和质控品2至少每24小时或每个试剂盒或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在设定的范围内。
如出现质控值落在范围以外，每个实验室应建立操作指南以采取校正措施。如果需要，样本需要重新测试。
【计算】
E170/Elecsys仪器会自动根据Cal 1和Cal 2的测定值计算Cut-off值。每一个标本的结果以有反应性或无反应性以及Cutoff指数（标本信号/Cutoff）报告。
【干扰因素】
该方法不受黄疸（胆红素<25mg/dl）、溶血（血红蛋白<1.6g/dl）、脂血（内脂<1000mg/dl）和生物素<30ng/ml等干扰。（标准：正确检测阴性和阳性样本）
接受高剂量生物素（>5mg/天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血7，8。
类风湿因子低于676U/ml时不受干扰。
19种常用药物经试验对本测定无干扰。
接受过小鼠单抗治疗或诊断的病人可能会得出不正确的结果。
偶尔会遇到抗链霉亲和素抗体的干扰。个别病例出现高浓度钌抗体发生干扰。
Elecsys Anti-HBc含的添加物最小化这些影响
