硫化氢是生物体内的重要成分之一，它参与多种生命调节过程。因此，观测硫化氢对健康和疾病状态的影响十分重要，但是目前缺乏在活体生物样本中选择性跟踪这种小分子的方法。这篇文章中，作者提出了一种新的方法，通过开发化学反应型的荧光探针来检测完整的活体生物系统中的硫化氢。硫代荧光素-1 (SF1)和硫代荧光素-2 (SF2)是一对第一代试剂，具有很强的荧光启动反应，对硫化氢具有选择性。它们可以被用来表达活细胞中这个小分子信号的变化。
作者首先合成了叠氮化合物SF1和SF2，并在生理pH值缓冲的水溶液中测试了这两种探针的荧光特性。实验表明加入硫化氢后，在1h内荧光分别达到7倍和9倍的增强。这是因为探针与硫化氢反应时叠氮基团会被还原为胺，进而产生较强的荧光。
此外，SF1和SF2对硫化氢的响应相比其他生物相关的RSS、活性氧(ROS)和活性氮具有选择性。从图中可以看出，这两种化合物与硫化氢反应产生的荧光强度比起其他生物体内氮氧类化合物都要强，尤其是SF2差别尤为明显，因而在用于体内硫化氢检测时具有良好的特异性识别效果。综上所述，这些选择性实验表明，将叠氮化物通过化学反应还原为胺，可用于生理pH条件下水溶液中硫化氢的荧光检测。
接下来，作者加入SF1和SF2在共聚焦显微镜下观察活体细胞成像模式下硫化氢水平变化的能力。发现在经过硫化氢处理的细胞中，细胞内荧光强度明显增强，且SF1的荧光强度明显大于SF2，这可能是由于SF1具有更大的细胞疏水性与滞留度。在实验过程中，Hoescht核染色的亮区域图像证实了细胞的活性。
总之，作者通过合成基于叠氮的荧光探针SF1和SF2，提出了一种新的生物硫化氢检测方法。这两种探针对水介质中硫化氢的检测具有很高的选择性，可用于活体细胞的成像。用于硫化氢在活细胞、组织和动物中的作用巨大，利用这些探针研究活细胞内硫化氢的内源性产生及其对生理和病理过程有着重大贡献。
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